Se percentuale CD4 è circa il 12-15%, il che significa che il numero di linfociti CD4 è inferiore a 200 cellule/mm3. Determina il numero di celle sistema immunitario. Se è pari al 15% significa che nel sangue sono presenti meno di 200 cellule/mm3 di linfociti. Un test della carica virale determina il numero di particelle virali in un fluido, più precisamente nel plasma sanguigno. Questo test rileva solo i geni dell’HIV, cioè l’RNA del virus.
Potrebbero esserci ancora copie di virus nel sangue, ma in quantità non rilevabili. I metodi di test della carica virale misurano solo il numero di copie del virus nel sangue. Questa quantità può essere diversa dalla carica virale in altre parti del corpo, come l'intestino o i linfonodi.
Perché una carica virale inferiore al limite di rilevamento è buona?
È auspicabile che non sia rilevabile ragioni varie. Se la tua carica virale non scende al di sotto del limite di rilevamento entro tre-sei mesi dall'inizio del trattamento, il medico ti parlerà della modifica della terapia. I risultati di questi test di resistenza sono più affidabili se la carica virale è pari o superiore a 200.
Ma col tempo, l’HIV prende il sopravvento e il numero delle cellule CD4 diminuisce. In questo caso, il virus è così piccolo che la carica virale non è rilevabile. Il monitoraggio regolare (controllo) della conta delle cellule CD4 e della carica virale è un buon indicatore di come l'HIV colpisce il corpo umano. Le cellule CD4, a volte chiamate cellule T helper, sono globuli bianchi responsabili della risposta immunitaria del corpo alle infezioni batteriche, fungine e virali.
Anche con una carica virale non rilevabile, a volte si verificano riacutizzazioni, vale a dire che la carica virale sale da sotto il limite di rilevamento a un livello rilevabile, sebbene basso, e poi di nuovo al di sotto del limite di rilevamento durante la misurazione successiva.
Esistono molte teorie sulle cause di tali epidemie. Lo studio ha rilevato che gli inverni sono più comuni, il che potrebbe supportare la teoria secondo cui l’infezione è una delle possibili cause. Se la tua carica virale è superiore al limite di rilevamento per due misurazioni consecutive, dovresti discutere con il tuo medico quali potrebbero essere le ragioni e se è necessario modificare la terapia.
Test della carica virale
Se la conta dei CD4 di una persona è elevata, non ha sintomi e non è in terapia ART, probabilmente avrà bisogno di controllare la conta delle cellule CD4 ogni pochi mesi. Ci sono due test molto importanti di cui hanno bisogno tutte le persone con HIV: lo stato immunitario e la carica virale.
La conta delle cellule CD4 viene misurata come il numero di cellule CD4 per millilitro di sangue (non nell'intero corpo). Se hai una conta di cellule CD4 relativamente alta, nessun sintomo e non stai assumendo una terapia antiretrovirale, è sufficiente sottoporre il tuo stato immunitario a un test ogni 3-6 mesi.
Se la carica virale nel sangue è elevata, anche la carica virale nel liquido seminale e nel liquido vaginale è elevata, e quindi anche il rischio di infettare altri. IN Ultimamente L’infettività dei pazienti sottoposti a terapia antiretrovirale con una carica virale non rilevabile nel sangue è stata ampiamente dibattuta.
La questione è ancora controversa. Se sei incinta o stai pianificando una gravidanza, dovresti parlare con il tuo medico delle opzioni di trattamento. Ciò che è importante è che la salute del tuo bambino e la salute del tuo bambino siano attentamente monitorate durante la gravidanza e dopo la nascita.
Il risultato della carica virale viene misurato nel numero di copie di HIV RNA per millilitro. Se hai avuto un’infezione o sei stato vaccinato di recente, la tua carica virale potrebbe aumentare temporaneamente.
Analisi dello stato immunitario
Nel loro insieme, la conta delle cellule CD4 e la carica virale forniscono una base per prevedere lo sviluppo dell’infezione da HIV a breve e medio termine. Se confrontiamo gli stessi indicatori dello stato immunitario nelle donne e negli uomini, nelle donne, in media, lo stato immunitario inizia a diminuire con una carica virale inferiore.
Alcuni parlano addirittura di una svolta, ma questo, ovviamente, è esagerato. Fungono da stazioni di filtraggio e producono e immagazzinano cellule che combattono le infezioni nel corpo. Ma ora questo può essere confutato. Il virus è sempre presente e quindi deve essere costantemente controllato dal sistema immunitario. C’è il sostegno di un numero crescente di farmaci. L’ampia gamma di opzioni terapeutiche esistite da allora ha portato a cambiamenti significativi nel comportamento dei medici. Dalla moderazione terapeutica finora dominante al nichilismo e all'uso metodi alternativi trattamento, non si avverte molto.
Secondo i medici, proprio nel ridurre la carica virale a un livello non rilevabile risiede lo scopo della terapia antiretrovirale
Quando il sistema immunitario comincia a reagire, la conta dei CD4 aumenta nuovamente, anche se non ai livelli basali. In alcuni casi, questo processo richiede molto più tempo.
Il calo medio annuo della conta dei CD4 è di circa 50 cellule/mm3. L'HIV attacca le cellule CD4+. La conta delle cellule CD4+ aiuta a determinare se possono verificarsi altre infezioni (infezioni opportunistiche). Osservando come l'infezione da HIV attacca il tuo sistema immunitario. Determinare quando è meglio iniziare la terapia antiretrovirale, che ridurrà il tasso di sviluppo dell'infezione da HIV nel corpo.
Questa reazione eccessiva ha un difetto cruciale. Entro pochi giorni dall’interruzione di questa terapia di combinazione, i parametri critici di laboratorio ritornano immediatamente ai valori basali. Spesso sono peggiori di prima della terapia. Occorre quindi fare attenzione a garantire che i pazienti siano preparati con molta attenzione e coscienziosità; un farmaco che dà loro anche abbastanza tempo per adattarsi alla terapia complessa.
Ma ci sono ragioni per essere ottimisti. Quattro innovazioni scientifiche hanno dato origine a questo. Nuove intuizioni sulla progressione della malattia sviluppate da David Ho di New York per determinare la carica virale di nuovi farmaci, risultati ora della valutazione della terapia di combinazione. C'è un'infezione iniziale associata a sintomi simil-influenzali. In questo caso il virus si moltiplica rapidamente, ma non influisce in modo significativo sulle difese del sistema immunitario. Questo deve essere configurato prima. Il corpo ha bisogno di diverse settimane per questo.
Se il tuo stato immunitario è superiore a 500 cellule, è consigliabile visitare il medico per misurare la carica virale ogni 4-6 mesi
La conta delle cellule CD4+ misurata al momento della diagnosi di HIV funge da punto di riferimento rispetto al quale verranno confrontate tutte le conte successive delle cellule CD4+.
Se nulla disturba particolarmente la persona infetta, deve essere esaminata due volte l'anno, cioè una volta ogni sei mesi. I più importanti in questo elenco sono gli ultimi due elementi.
L’attuale concetto di malattia è associato all’interazione tra virologi, clinici e matematici. Ciò è particolarmente vero durante la fase di latenza. Negli ultimi dieci anni è spesso scoppiata una disputa tra il corpo e il virus. Ma sono passati sei mesi da quando possiamo vedere come andrà a finire questa lotta. La quantità di virus che può essere misurata in questo momento determina la prognosi. In altri casi, l’attuale carica virale è predittiva. L'altezza di questo specchio dipende da diversi fattori, tra cui la quantità di virus, la virulenza del tipo di virus in questione e la capacità di formare sincizi.
Lo stato immunitario è simile alla distanza rimanente fino all'obiettivo finale e la carica virale dell'HIV è la velocità del movimento. Per le persone infette dall’HIV, il numero di cellule CD4 presenti nel sangue è importante. Questi globuli bianchi sono responsabili del riconoscimento dei batteri patogeni.
Pertanto, questo aumento porta ad un cambiamento nel decorso della malattia con il passaggio alla fase sintomatica. Per la situazione epidemiologica vale il contrario. Di solito viene determinato utilizzando una sonda genetica, una reazione a catena della polimerasi e quindi conteggiato in copie virali o equivalenti.
Viene misurato come parametri quantitativi solo nel sangue. Questo compartimento contiene solo il 2% della carica virale effettiva poiché la maggior parte dei virus si trova nel tessuto linfatico. Tuttavia, la carica virale plasmatica è considerata una misura adeguata della carica virale totale del corpo perché è ben correlata ad essa.
Tuttavia, se la carica virale nel sangue scende a livelli non rilevabili dopo l'assunzione della terapia, ciò non significa che non sia più presente il virus nel liquido seminale o nelle secrezioni vaginali
Queste cellule muoiono se infettate dal virus dell’immunodeficienza. Muoiono in gran numero ogni giorno, ma il corpo li produce per sostituirli. Se un paziente sieropositivo gode di condizioni di salute normali, è possibile eseguire un test sullo stato immunitario una volta ogni tre o sei mesi. Questo test ha una soglia più bassa, inferiore a 400-500 copie/ml.
La quantità di virus nel cervello non è ancora chiara. Attualmente sul mercato esistono diversi metodi di prova con larghezze di misura molto diverse. Pertanto, nel caso di un messaggio veramente piacevole “carica virale non rilevabile”, bisogna tenere conto dell’ampiezza della misurazione e quindi della sensibilità del test utilizzato. In ogni caso, questo messaggio significa che non ci sono virus nel sangue o nel corpo.
La distruzione del virus durante il trattamento antivirale avviene nel sangue in due fasi. L’obiettivo della terapia antiretrovirale non è solo ridurre la quantità di virus di un passo logaritmico, ma anche spingerlo al di sotto del limite di rilevazione di circa 500 copie per millilitro di plasma.
Il livello di carica virale può aumentare a causa di una vaccinazione profilattica, di qualsiasi infezione o malattia precedente. Cioè, devi agire come quando fai i test per il tuo stato immunitario. Oggigiorno vengono utilizzati diversi tipi di test della carica virale e ciascun sistema di test rileva le particelle virali a modo suo. Ciò significa che dipende da loro quale sarà il risultato: medio, alto o basso.
I livelli delle cellule T helper plasmatiche vengono ora utilizzati principalmente per valutare il rischio di infezioni opportunistiche. A proposito, un aumento della quantità di virus può essere considerato un segno dello sviluppo di resistenza. Oltre agli affermati inibitori nucleosidici della trascrittasi inversa, nell’ultimo anno sono stati immessi sul mercato molti nuovi farmaci. Seguono principi operativi completamente nuovi. Diversi punti di combinazione portano a effetti combinati favorevoli.
La combinazione di diversi principi attivi consente contemporaneamente il dosaggio di sostanze contaminate con effetti collaterali significativi e quindi di migliorare la tollerabilità e l'accettazione da parte dei pazienti. Le combinazioni triple si sono rivelate le migliori. L’efficacia antivirale dei nuovi farmaci supera significativamente l’efficacia antivirale dei farmaci. Pertanto, per la prima volta esiste la possibilità di ritardare significativamente il decorso della malattia e forse addirittura di arrestarla entro diversi anni.
Nessuno di questi fattori sembra influenzare la capacità del sistema immunitario di combattere le infezioni. Dopo l'infezione, il livello del CD-4 diminuisce bruscamente per poi stabilizzarsi a 500-600 cellule. Si ritiene che le persone i cui livelli di CD-4 inizialmente diminuiscono più velocemente e si stabilizzano a un livello inferiore rispetto ad altri abbiano maggiori probabilità di sviluppare l’infezione da HIV più rapidamente. Anche quando una persona non presenta sintomi evidenti di HIV, milioni delle sue cellule CD-4 si infettano e muoiono ogni giorno, mentre altri milioni vengono prodotti dall'organismo e si sollevano per proteggere l'organismo.
Allo stesso tempo un gran numero di nuovi farmaci comportano uno stress aggiuntivo per il medico e il paziente. È necessario elaborare piani di trattamento complicati e spesso è necessario ingoiare dieci compresse al giorno. L’obiettivo della terapia individuale è mantenere oggi una carica virale bassa e allo stesso tempo ritardare il più a lungo possibile lo sviluppo della resistenza ai farmaci. Ciò rende superflua la questione schematica del trattamento precoce o tardivo.
Come può svilupparsi la resistenza? Innanzitutto è importante sapere che tutte le sostanze, se utilizzate in monoterapia, perdono rapidamente la loro efficacia attraverso lo sviluppo di resistenze. A volte questa resistenza si estende anche alle sostanze correlate. Per sviluppare resistenza siamo ora responsabili di tre fattori.
Se la conta delle cellule CD4 è pari o inferiore a 200-250 cellule/ml, si raccomanda di iniziare la terapia, poiché con tale stato immunitario esiste il rischio di malattie associate all'AIDS
Il CD4 può servire a determinare la necessità di iniziare la terapia ARV e come indicatore della sua efficacia. Quando la conta delle cellule CD4 scende a 350, il medico dovrebbe aiutare la persona a determinare se ha bisogno di iniziare la ART. I medici raccomandano che una persona inizi la terapia ARV quando la conta dei CD4 scende a 250-200 cellule. Questo livello di cellule CD4 significa che una persona è in reale pericolo di sviluppare l'AIDS, una malattia associata.
Il numero di mutazioni, diminuzione dell'inibizione della riproduzione del virus, concentrazione non ottimale della sostanza nelle cellule bersaglio in cui si trova il virus. Tuttavia, la posizione della resistenza può essere prevista in anticipo utilizzando un antivirogramma simile al classico antibiogramma della batteriologia. La compliance, ovvero l'osservanza da parte del paziente delle istruzioni mediche, gioca un ruolo importante.
Se, ad esempio, gli inibitori della proteasi non vengono distribuiti uniformemente durante la giornata o vengono invece smaltiti durante i pasti, lo sviluppo della resistenza accelera in modo insolito. La stessa cosa accade quando il consumo viene semplicemente interrotto per uno o più giorni a causa di effetti collaterali. Secondo l'esperienza del Robert Koch Institute di Berlino, il 40% dei casi di sviluppo di resistenza sono i cosiddetti “errori di ammissione” dei pazienti.
Esiste una differenza significativa nella progressione dell’infezione da HIV quando si confrontano le cariche virali inferiori a 5.000 copie e superiori a 50.000 copie/ml, anche se lo stato immunitario è superiore a 500 cellule. L'HIV può infettare i CD4 e creare copie di se stesso al loro interno, provocando la morte delle cellule.
Un test della carica virale determina la quantità di HIV nel sangue. Più copie del virus sono presenti nel sangue (cioè maggiore è la carica virale), più velocemente diminuisce il numero dei linfociti CD4 e maggiore è il rischio di sviluppare malattie.
Dividiamo i farmaci in due gruppi principali
Impostando il blocco sbagliato durante il processo di copia, questo si interrompe e contemporaneamente viene bloccato il virus. Questi includono indinavir, ritonavir e saquinavir, con quest'ultimo che ha il valore più basso effetti collaterali. Uno dei tre inibitori della proteasi è solitamente combinato con due analoghi nucleosidici. Ciò inibisce l'integrasi, un enzima che consente al genoma virale di essere incorporato nei cromosomi della cellula ospite. Tuttavia, tutti, nessuno escluso, non sono ancora riusciti a dimostrare la loro efficacia clinica. I preparati a base di vischio come Iscador devono ancora dimostrare la loro efficacia. L'effetto non è stato ancora raggiunto. . La valutazione clinica è fondamentale in questa fase di diversità delle sostanze innovative.
Un test della carica virale misura il numero di copie genetiche dell’HIV nel sangue. Il risultato mostra il numero di copie di HIV RNA per millilitro di sangue (il medico molto probabilmente indicherà semplicemente il numero). Una carica virale di 10.000 è considerata bassa e 100.000 è considerata alta.
Se non stai assumendo la terapia, dovrai sottoporti regolarmente ai test della carica virale. I risultati di questi test indicano la misura in cui l'HIV influenzerà il tuo corpo se non trattato. Se una persona ha una conta di CD4 e una carica virale elevate, ha maggiori probabilità di perdere cellule CD4 e ammalarsi rispetto a una persona con una conta di CD4 elevata e una carica virale bassa.
I benefici terapeutici delle triple combinazioni sono stati ormai confermati in molti studi. È stato dimostrato che con questa combinazione il rischio di progressione della malattia può essere ridotto del 50%. È stato sottolineato che non sono stati osservati ulteriori effetti collaterali indesiderati.
Cameron. Altri critici disapprovano il ritmo serrato con cui vengono approvate le nuove sostanze e il deterioramento dei test e degli standard di sicurezza. Pertanto, gli inibitori della proteasi erano consentiti solo temporaneamente; Si tratta ancora di una procedura insolita, in cui è ancora in sospeso lo screening per possibili danni a lungo termine in termini di insorgenza del cancro e danni microbici.
Fino all’inizio del trattamento, i risultati del test della carica virale possono variare ogni volta. Un aumento della carica virale nella maggior parte dei casi non dovrebbe essere motivo di preoccupazione, poiché anche un suo raddoppio non è solitamente significativo per l'organismo.
Le ragioni di un aumento temporaneo della carica virale possono includere la vaccinazione (ad esempio contro l’influenza) e le infezioni. Il medico dovrebbe considerare questi fattori quando analizza i risultati.
Un altro punto critico è la diminuzione della qualità della vita dovuta all’uso prolungato di numerosi farmaci. Questa espressione un po’ antiquata dell’immunologia afferma che una persona diventa immune a una malattia infettiva anche senza essere chiaramente malata.
Ciò è dovuto al fatto che alla prima infezione gli agenti patogeni vengono già completamente distrutti dal sistema immunitario e gli anticorpi protettivi rimangono lontani da questa disputa tra l'agente patogeno e l'ospite. Il numero di virus durante l'infezione primaria è probabilmente molto piccolo.
Come per la conta delle cellule CD4, le misurazioni della carica virale vengono valutate meglio su un periodo di tempo. Le situazioni in cui la carica virale è in costante aumento da diversi mesi o quando è “improvvisamente” più che triplicata possono essere motivo di preoccupazione.
Esempio: se non stai facendo terapia, un aumento della carica virale da 5.000 a 15.000 non deve spaventarti. Aumento anche da 50.000 a 100.000
non è considerato significativo: questi indicatori rientrano nei limiti di errore del test. Tuttavia, un aumento della carica virale da 5.000 a 25.000 richiede misure aggiuntive perché indica un aumento di cinque volte
il numero di copie del virus nel sangue dall'ultimo test.
In questo caso, molto probabilmente il medico ordinerà di ripetere il test.
Se sorge la domanda sull’inizio del trattamento per l’infezione da HIV, il medico discuterà con te, tra le altre cose, anche dei tuoi livelli di carica virale. Come accennato in precedenza, si consiglia di iniziare il trattamento per le persone con una conta di linfociti CD4 pari a circa 350. Il trattamento è ancora più necessario quando, a tali livelli, la carica virale è pari o superiore a 100.000.
Dopo aver iniziato il trattamento per l’infezione da HIV, i livelli di carica virale dovrebbero diminuire gradualmente. L’obiettivo della terapia è raggiungere una carica virale non rilevabile (di solito da tre a sei mesi dopo l’inizio della terapia).
Il medico ti chiederà di eseguire un test della carica virale un mese dopo l'inizio della terapia e poi 12 settimane dopo la prima assunzione dei farmaci. In futuro, verrà eseguito un test della carica virale ogni tre-sei mesi, così come un test del conteggio delle cellule CD4.
La sensibilità di tutti i test della carica virale è limitata a un determinato numero minimo di copie. Questo è chiamato limite di rilevabilità e per i test attualmente disponibili questo limite è di 40-50 copie/ml. Se la tua carica virale è inferiore a 40 o 50, viene definita "non rilevabile". L’obiettivo del trattamento dell’HIV è raggiungere una carica virale non rilevabile.
Tuttavia, l’incapacità di rilevare la quantità di virus nel sangue non significa che sia completamente scomparso dal corpo. Il virus può persistere nel sangue, anche se il suo numero di copie non può essere misurato perché è troppo piccolo. I test della carica virale misurano solo la quantità di virus nel sangue, che può differire dalla carica virale in diversi tessuti e organi, come l’intestino o i linfonodi.
Perché è bene avere una carica virale non rilevabile?
Il raggiungimento di una carica virale non rilevabile è importante per i seguenti motivi.
Innanzitutto, significa che il rischio di problemi di salute dovuti all’infezione da HIV è significativamente ridotto, così come il rischio di sviluppare altre malattie gravi (come malattie cardiovascolari come infarto o ictus).
In secondo luogo, una carica virale non rilevabile riduce il rischio di resistenza dell’HIV ai farmaci antiretrovirali.
Infine, una carica virale non rilevabile riduce la probabilità di infettare un’altra persona (vedi sotto per informazioni al riguardo).
Carica virale determinabile nel trattamento dell’infezione da HIV
Se la carica virale non è scesa a un livello non rilevabile da tre a sei mesi dopo l'inizio del trattamento, il medico discuterà le opzioni per modificare il regime terapeutico, compreso il cambiamento dei farmaci.
Se sei in cura e la tua carica virale scende fino a diventare non rilevabile e poi torna a essere rilevabile, potrebbe essere necessario modificare il regime di trattamento.
Una carica virale rilevabile durante il trattamento dell'infezione da HIV può indicare che il virus sta diventando resistente non solo ai farmaci che stai attualmente assumendo, ma anche ai loro analoghi.
Prove di resistenza
Prima di iniziare il trattamento e prima di cambiare farmaco a causa della carica virale rilevabile, sarà necessario sottoporsi a un test di resistenza.
Questo esame del sangue ti mostrerà quali tipi di farmaci sono i migliori per te.
I risultati del test saranno più affidabili se la tua carica virale è almeno 200.
"Un'ondata virale"
Le persone con una carica virale non rilevabile a volte sperimentano un fenomeno chiamato “ondata virale”: la carica virale sale a un livello rilevabile, per poi tornare a non essere rilevabile al test successivo.
Un’ondata virale di solito non significa che i farmaci antiretrovirali che ti sono stati prescritti non “funzionano” più. Sulle ragioni di tali sfoghi
Ci sono diverse teorie. Quelli più plausibili sono quelli che spiegano questo fenomeno con un errore di laboratorio o con l'influenza di un'altra infezione (ad esempio raffreddore o influenza). Uno studio ha scoperto che i picchi virali erano più comuni in inverno, supportando la teoria correlata all’infezione.
Tuttavia, se due test consecutivi mostrano una carica virale rilevabile, dovresti discutere questa situazione, le sue possibili cause e la necessità di modificare il tuo regime terapeutico con il tuo medico.
Carica virale e trasmissione dell'infezione da HIV attraverso il contatto sessuale
Se la carica virale nel sangue è elevata, è probabile che sia elevata nel liquido seminale o nel liquido vaginale. Quando la tua carica virale è alta, aumenta il rischio di infettare altre persone.
Nel trattamento dell’infezione da HIV e nella riduzione della carica virale nel sangue, diminuisce anche la carica virale nello sperma e nelle secrezioni vaginali.
Attualmente, gli esperti stanno discutendo attivamente sulla probabilità che una persona infetti altre persone.
sottoposti a trattamento e con una carica virale non rilevabile nel sangue.
Questo problema è ancora controverso e l'argomento viene regolarmente aggiornato con nuove informazioni.
Carica virale e trasmissione da madre a figlio dell’infezione da HIV
Il trattamento dell’HIV è estremamente efficace nel prevenire la trasmissione del virus da madre a figlio. Se sei incinta o stai pianificando una gravidanza, discuti i possibili regimi di trattamento con il tuo medico.
Se la carica virale rimane non rilevabile durante la gravidanza e il parto, la probabilità di trasmettere il virus al bambino è estremamente bassa. A questo proposito, è molto importante durante la gravidanza e dopo il parto sottoporvi a regolari esami medici per determinare la carica virale vostra e del vostro bambino, nonché per verificare il vostro stato di salute generale.
Stato immunitario umano, metodi di valutazioneDomande principali
1.Stato immunitario e suoi disturbi.
2.Sindromi immunopatologiche.
3.Test immunologici di livello 1 e 2.
4.Regole per la valutazione degli immunogrammi.
5. Metodi per la valutazione dei linfociti.
1
Stato immunitario
Lo stato immunitario è quantitativo ecaratteristiche qualitative della condizione
attività funzionale degli organi
sistema immunitario e alcuni
meccanismi non specifici
protezione antimicrobica.
2Lo stato immunitario è determinato dall’efficacia
e la coerenza del funzionamento di tutti i sistemi e
collegamenti di immunità - macrofagi,
complemento, citochine, linfociti T e B,
principale sistema di istocompatibilità.
Branca della medicina che studia la patologia
persona in termini di disfunzione
sistema immunitario, chiamato clinico
immunologia.
3
Lo studio dello stato immunitario comprende:
1) determinazione del gruppo sanguigno e del fattore Rh;2) analisi generale sangue con un leucogramma dettagliato o
formula;
3) determinazione della quantità di immunoglobuline;
4) studio dei linfociti;
5) studio dell'attività fagocitaria dei neutrofili.
Per fare una diagnosi immunopatologica
vengono eseguite le condizioni: raccolta di una storia immunologica,
allestimento laboratorio clinico, strumentale e
test immunologici.
4Prendendo la storia
Durante il sondaggio, il probabile
sindrome immunopatologica, la principale
Sono:
- sindrome infettiva;
- sindromi allergiche e autoimmuni;
- immunodeficienza primaria;
- immunodeficienza secondaria;
- sindrome immunoproliferativa.
5- tenendo conto dei possibili individui
caratteristiche (età, associati
malattie) e fluttuazioni degli indicatori
(fisiologico e patologico - ricezione
cibo, esercizio fisico, Momenti della giornata,
l'effetto dei fattori di stress, ecc.);
- tenendo conto degli standard regionali;
6Regole generali per la valutazione degli immunogrammi:
- un'analisi completa, piuttosto che una valutazione di una sola
indicatore;
- analisi in combinazione con cliniche e
dati anamnestici;
- valutazione di bruschi cambiamenti negli indicatori (non
inferiore al 20% della norma);
- analisi in dinamica;
- analisi non solo (e non tanto)
dati assoluti, ma rapporti
indicatori (soprattutto indice Th/Ts);
7Petrov R.V. et al. ha creato un approccio in due fasi
valutazione dello stato immunitario, in base al quale
i test immunologici sono suddivisi in test
primo e secondo livello.
Nella prima fase, utilizzando metodi semplici
rivelare difetti “grossolani” nella fagocitosi, cellulare
e immunità umorale.
Le prove di primo livello comprendono:
- determinazione del numero di linfociti nel sangue (ass., rel.);
- determinazione del numero di linfociti T e B;
- determinazione del livello delle classi Ig IgG, IgM, IgA;
- determinazione dell'attività fagocitaria dei leucociti;
- determinazione del titolo del complemento.
Tenendo conto dell'analisi dei risultati, viene determinato
ulteriori tattiche di ricerca.
8
Leucociti
La norma è 3,5–8,8 4 109/l. Aumento del numero di leucociti –questa è leucocitosi, una diminuzione è leucopenia. Leucocitosi
divise in fisiologiche e patologiche.
la leucocitosi fisiologica può essere l'assunzione di cibo,
lavoro fisico, fare bagni caldi e freddi,
gravidanza, parto, periodo premestruale.
La leucocitosi patologica si verifica con l'infezione
malattie (polmonite, meningite, sepsi generale e
ecc.), malattie infettive con danno cellulare
sistema immunitario. Ma ci sono anche delle eccezioni. Per esempio,
Alcune malattie infettive si verificano con
leucopenia (febbre tifoide, brucellosi, malaria,
rosolia, morbillo, influenza, epatite virale in fase acuta).
9
Linfociti
Norma: contenuto assoluto – 1,2–3,0 109/l, ma più spessoV analisi clinicaè indicata la percentuale del sangue
contenuto di linfociti.
Questa cifra è del 19-37%.
La linfocitosi si trova in cronica
leucemia linfocitica, malattia cronica da radiazioni,
asma bronchiale, tireotossicosi, alcuni
malattie infettive (pertosse, tubercolosi),
quando si rimuove la milza.
Anomalie dello sviluppo portano alla linfopenia
sistema linfoide, infezioni virali,
radiazioni ionizzanti, malattie autoimmuni
(lupus eritematoso sistemico), malattie endocrine
(morbo di Cushing, assunzione di farmaci ormonali),
AIDS.
10
Linfociti T
Norma: contenuto relativo 50–90%, assoluto – 0,8–2,5 109/l.
Il numero di linfociti T aumenta con
malattie allergiche, durante
guarigione dalla tubercolosi. Declino
contenuto di linfociti T si verifica quando
infezioni croniche, immunodeficienze,
tumori, stress, traumi, ustioni,
alcune forme di allergie, infarto.
11
Cellule T helper
Norma: contenuto relativo – 30–50%, assoluto – 0,6–1,6 109/l.
Il contenuto delle cellule T-helper aumenta con
infezioni, malattie allergiche,
Malattie autoimmuni
(artrite reumatoide, ecc.). Declino
il contenuto delle cellule T-helper si verifica quando
stati di immunodeficienza, AIDS,
infezione da citomegalovirus.
12
linfociti B
Norma: contenuto relativo – 10–30%, assoluto – 0,1–0,9 in 109/l.
L'aumento del contenuto si verifica quando
infezioni, malattie autoimmuni,
allergie, leucemia linfocitica.
Diminuzione del numero dei linfociti B
riscontrato nelle immunodeficienze,
tumori.
13
Fagociti (neutrofili)
La loro attività viene valutata utilizzando metodi chedeterminare la parte di cellule in grado di formarsi al loro interno
fagosoma.
Per valutare la capacità digestiva dei neutrofili
utilizzare il test NBT (NBT è un colorante blu nitro
tetrazolio).
La norma del test NST è del 10–30%. Attività fagocitica
aumento della conta leucocitaria durante le infezioni batteriche acute,
diminuzioni delle immunodeficienze congenite, croniche
infezioni, malattie autoimmuni, allergie, virali
infezioni, AIDS.
L'attività dei fagociti è valutata dal cosiddetto
numero fagocitario (normalmente la cellula assorbe 5-10
particelle microbiche), numero di fagociti attivi, indice
completezza della fagocitosi (deve essere maggiore di 1,0).
14
Metodi per lo studio dei linfociti
Studio degli antigeni CD di superficieÈ basato su:
metodi di formazione delle rosette;
metodo di citometria a flusso;
metodi di immunofluorescenza;
dosaggio immunoenzimatico.
I test funzionali includono metodi di valutazione
attività proliferativa dei linfociti su T- e
Mitogeni B (reazione RBTL-blastica
trasformazione dei linfociti), sintesi
cellule mononucleari contenenti citochine.
15Per determinare il numero di cellule T, utilizzare
metodo di formazione delle rosette con globuli rossi
ariete.
Il metodo si basa sull'affinità del recettore CD2 con
proteine della membrana eritrocitaria di pecora. A
mescolando linfociti con eritrociti di pecora
si formano figure sotto forma di rosette.
Numero di cellule che formano rosette (E-ROC)
corrisponde al numero di linfociti T (CD2+
cellule).
Per determinare il numero di cellule B, utilizzare
Prese EAC. I linfociti sono mescolati con
trattati con globuli rossi bovini
complemento e anticorpi contro i globuli rossi.
Il metodo moderno è la citometria a flusso.
16È della massima importanza
calcolo immunoregolatorio
Indice CD4/CD8 (rapporto helper-soppressore).
I CD8+ sono trasportati dalle cellule T-suppressor e Tkiller, che fanno parte delle cellule NK.
I CD4+ sono trasportati da T-helper e Tinduttori, monociti, cellule T del DTH.
1718
Principio di base dell'immunocitometria:
mAbs marcati fluorescenticon cui passa la cellula in studio
flusso di liquido attraverso il capillare.
Il flusso viene attraversato da un raggio laser.
Il dispositivo registra il riflesso da
segnale della superficie cellulare
principio "sì/no".
Cambiando il laser trasmesso
i parametri dell'onda sono determinati e
dimensioni della gabbia (diritta e laterale
dispersione di luce).
Il raggio laser induce
fluorescenza dell'MCA sulla superficie
celle, che fornisce informazioni su
la presenza di alcuni recettori
strutture.
Come risultato della sommatoria
informazioni su tutta la popolazione
celle che il dispositivo produce in modo accurato
quantitativo e qualitativo
analisi dello stato cellulare
popolazioni.
19Il pannello MCA standard consente di determinare
i seguenti marcatori DM: DM3 (cellule T), DM4 (T-helper), DM8 (T-citotossico), DM20 (cellule B),
CD16 (cellule NK), CD14 (monociti/macrofagi), CD25
(recettore IL-2).
20Metodi per studiare i principali
componenti del sistema immunitario accettati
anch'esso suddiviso in screening e
allargato.
Nel valutare il sistema B di immunità a
i test di screening includono la determinazione
numero di cellule CD19+ e CD20+, IgG, IgM e IgA,
a schierato - trasformazione esplosiva
(RBTL) per il mitogeno di asclepiade e S.aureus,
marcatori di superficie dei linfociti B.
21
Immunoglobuline Jg
Immunoglobulina A. Normale: 0,6–4,5 g/l.JgA aumenta durante le infezioni acute, autoimmuni
malattie (di solito nei polmoni o nell'intestino), nefropatie.
Una diminuzione di JgA si verifica quando malattie croniche(particolarmente
sistema respiratorio e tratto gastrointestinale), purulento
processi, tubercolosi, tumori, immunodeficienze.
Immunoglobulina E. Normale: 0-0,38 mg/l. La quantità è in aumento
JgE per reazioni allergiche ereditarie,
lesioni allergiche dell'apparato respiratorio da funghi
Aspergillus, infestazione da elminti
Una diminuzione di JgE si verifica con infezioni croniche, assunzione
farmaci che inibiscono la divisione cellulare, innati
malattie da immunodeficienza.
22Immunoglobulina M. Normale: 0,6–3,4 g/l.
Il contenuto di JgM aumenta con
asma bronchiale, infezioni (acute e
cronico), durante le riacutizzazioni, autoimmune
malattie (soprattutto reumatoidi
artrite). JgM diminuisce durante la primaria e
immunodeficienze secondarie.
Immunoglobulina G. Normale: 6,0-17,6 g/l.
La quantità di JgG aumenta nel sangue quando
allergie, malattie autoimmuni,
infezioni pregresse.
Una diminuzione del contenuto JgG si verifica quando
immunodeficienze primarie e secondarie.
23Test di secondo livello: un'analisi più approfondita dello stato del sistema immunitario
effettuata con metodi analitici: metodi di valutazione
attività funzionale dei linfociti T e B, dei fagociti,
cellule ausiliarie, cellule natural killer, componenti di sistema
complemento, ecc.
test di immunofenotipizzazione per determinare relativi e
numero assoluto di popolazioni e sottopopolazioni di linfociti T, B, NK;
marcatori di attivazione linfocitaria;
valutazione dei vari stadi della fagocitosi e dell'apparato recettoriale
cellule fagocitiche;
determinazione delle principali classi e sottoclassi di immunoglobuline;
immunocomplessi circolanti;
determinazione della concentrazione dei componenti del complemento nel siero del sangue
(inibitore C3, C4, C5, C1);
attività funzionale di varie sottopopolazioni di linfociti;
valutazione dell'attività proliferativa dei linfociti T e B;
studio dello stato dell'interferone;
test cutanei, ecc.
24Tutti gli standard di cui sopra
gli indicatori dello stato immunitario possono
variare leggermente in diverso
laboratori immunologici. Questo
dipende dalla tecnica diagnostica e
reagenti utilizzati. Ma immune
sistema, come qualsiasi altro sistema
corpo, può avere disturbi
eventuali collegamenti. Ecco come nascono
immunodeficienze.
25Va sottolineato soprattutto che un'analisi completa
gli immunogrammi sono possibili solo in combinazione con quelli clinici
condizione e storia medica del paziente.
Assenza di cambiamenti caratteristici nell'immunogramma durante
espresso sintomi clinici dovrebbe essere considerato
una reazione atipica del sistema immunitario, che è
segno aggravante della malattia.
I dati dei pazienti ottenuti vengono confrontati con la media
valori per un dato analita ottenuti nella regione
residenza del paziente. Indicatori medi
variano a seconda della regione e sono soggetti a
condizioni climatiche e geografiche, condizioni ambientali,
condizioni di vita.
È inoltre necessario tenere conto dell'età e del ritmo circadiano del paziente
ritmi.
L'immunologia è lo studio degli organi, delle cellule e delle molecole che compongono il sistema immunitario, responsabili del rilevamento e dell'eliminazione delle sostanze estranee. L'immunologia studia la struttura e la funzione del sistema immunitario, la sua risposta agli agenti patogeni, le conseguenze della risposta immunitaria e come influenzarli.
La parola latina "immunitas" significa "libertà dalla malattia", questo termine è sancito nell'edizione del 1869 del dizionario francese.
I meccanismi di difesa immunitaria vengono sempre attivati quando un particolare organismo incontra uno o un altro materiale antigenicamente estraneo - siano essi batteri, virus, cellule del corpo mutatamente alterate (cellule tumorali), trapianti di tessuti e organi o semplici composti chimici, a cui vengono attribuite proprietà immunogeniche.
La necessità di valutare l'immunità umana sorge in caso di malattie allergiche, autoimmuni e immunodeficienze, quando è necessario identificare il collegamento compromesso dell'immunità, effettuare il monitoraggio per selezionare un metodo di trattamento, valutarne l'efficacia e prevedere l'esito della malattia .
Maggior parte quadro completo Lo stato dell'immunità di una persona è determinato da un esame del sangue immunologico - stato immunitario (immunogramma). Questa analisi è composta da due componenti. Immunità umorale dà un'idea della concentrazione di immunoglobuline e altre proteine protettive nel sangue. Immunità cellulare integra l'esame immunologico del sangue e dà un'idea della quantità e della qualità delle cellule del sangue protettive: i linfociti, che forniscono l'immunità antivirale.
Quali problemi può risolvere la ricerca immunologica?
- Identificare la presenza nell'ambiente biologico (ad esempio, nel siero del sangue) di antigeni o anticorpi specifici importanti per la diagnosi e diagnosi differenziale malattie organi interni: a) a-fetoproteina, antigeni tumorali embrionali e altri tumori; b) antigeni che causano malattie infettive (polmonite, epatite, influenza, AIDS, ecc.); c) antigeni specifici (allergeni) per malattie allergiche.
- Determinare i cambiamenti immunologici caratteristici di alcune malattie autoimmuni, compresa l'identificazione di anticorpi specifici per organo, disturbi nel sistema del complemento e disturbi dell'immunità cellulare (malattie sistemiche tessuto connettivo, autoimmune anemia emolitica, porpora trombocitopenica, mieloma, macroglobulinemia di Waldenström, ecc.).
- Diagnosticare condizioni di immunodeficienza primaria e secondaria.
- Scegliere una terapia immunomodulante adeguata.
- Monitorare l'efficacia e gli effetti collaterali della terapia immunosoppressiva e citotossica.
- Monitorare lo stato del sistema immunitario durante l'auto e l'allotrapianto di organi e tessuti.
Classificazione degli stati di immunodeficienza
Immunodeficienze primitive- Questo disturbi congeniti stati di immunità con difetti in uno o più dei suoi componenti (immunità cellulare o umorale, fagocitosi, sistema del complemento).
Classificazione delle condizioni di immunodeficienza primaria:
1. patologia dell'immunità umorale, cioè insufficienza della produzione di anticorpi;
2. patologia dell'immunità cellulare mediata dai linfociti T;
3. forme combinate (SCID) di deficit umorale e linfocitario.
Condizioni di immunodeficienza secondaria sono disturbi del sistema immunitario che si sviluppano nel periodo postneonatale nei bambini o negli adulti e non sono il risultato di difetti genetici. Cause che portano allo sviluppo di stati di immunodeficienza secondaria: carenza nutrizionale, virale cronica e infezioni batteriche, chemioterapia e terapia corticosteroidea, uso irrazionale di farmaci, atrofia del timo legata all'età, esposizione a radiazioni, alimentazione squilibrata, scarsa qualità bevendo acqua, interventi chirurgici estesi, attività fisica eccessiva, lesioni multiple, stress, esposizione a pesticidi e altri fattori ambientali.
Classificazione. Classificazione degli stati di immunodeficienza secondaria.
1. Sistemico, che si sviluppa a seguito di danni all'immunogenesi (con lesioni da radiazioni, tossiche, infettive e da stress).
2. Locale, caratterizzato da danno regionale alle cellule immunocompetenti (disturbi locali del sistema immunitario delle mucose, della pelle e di altri tessuti, sviluppati a seguito di disturbi infiammatori, atrofici e ipossici locali).
Malattie accompagnate da condizioni di immunodeficienza secondaria
- Malattie infettive: malattie protozoarie ed elmintiche; infezioni batteriche, virali e fungine.
- Disturbi nutrizionali: esaurimento, cachessia, sindrome da malassorbimento, ecc.
- Intossicazioni esogene ed endogene - in caso di insufficienza renale ed epatica, in caso di avvelenamento, ecc.
- Tumori del tessuto linforeticolare (leucemia linfocitica, timoma, granulomatosi ed altre neoplasie).
- Malattie metaboliche (diabete mellito).
- Perdita di proteine durante malattie intestinali, con sindrome nefrosica, malattia da ustione, ecc.
- Azione vari tipi radiazione.
- Grave stress a lungo termine.
- Azione dei farmaci.
- Blocco dei linfociti da parte di complessi immunitari e anticorpi nelle malattie allergiche e autoimmuni.
Valutazione dello stato immunitario rilevante soprattutto per coloro che sono spesso malati raffreddori , per i malati malattie infettive croniche– epatite, herpes, HIV. Per le persone infette da HIV, è particolarmente importante sottoporsi regolarmente a un esame del sangue immunologico, perché Solo i dati sull'immunità cellulare, più precisamente sullo stato del pool di linfociti CD4, riflettono in modo affidabile la dinamica dello sviluppo della malattia e consentono di fare previsioni relativamente accurate.
Non meno importanti sono gli esami del sangue immunologici pazienti allergici e reumatologici, delle persone affetti da malattie del tratto gastrointestinale. Un esame del sangue immunologico consente di determinare il numero di linfociti e la concentrazione dei loro vari sottotipi, la presenza di immunoglobuline IgM, IgA, IgG, valutare lo stato dell'interferone del paziente e identificare la sua sensibilità a determinati farmaci o induttori dell'interferone.
Costo dei test per lo stato immunitario nel nostro centro medico
| Titolo di studio | Materiale clinico | Risultato | Data di scadenza | Prezzo |
| Stato immunitario | ||||
| Studio delle sottopopolazioni linfocitarie | ||||
| Pannello minimo: CD3,CD4,CD8,CD19,CD16(56), CD3+HLA-DR+, CD3+CD16(56)+(EK-T), CD4/CD8 | sangue con eparina | % di contenuto e ass. contare | 5 w.d. | 3100,00 rubli. |
| Pannello esteso: CD3,CD4,CD8,CD19,CD16(56), CD3+HLA-DR+, CD3+CD16(56)+(EK-T), CD8+CD38+, CD3+CD25+, CD3+CD56+, CD95, CD4 /CD8 | sangue con eparina | % di contenuto e ass. contare | 5 w.d. | 4940,00 rub. |
| Pannello di livello 1: CD3,CD4,CD8,CD19,CD16,CD4/CD8 | sangue con eparina | % di contenuto e ass. contare | 5 w.d. | 2210,00 rubli. |
| Indice immunoregolatorio (CD3,CD4,CD8, CD4/CD8) | sangue con eparina | % di contenuto e ass. contare | 5 w.d. | 1890,00 rubli. |
| Linfociti attivati CD3+CDHLA-DR+,CD8+CD38+CD3+CD25+CD95 | sangue con eparina | %contenuto | 5 w.d. | 2730,00 rubli. |
| Linfociti/cellule di memoria CD4 "naive" CD45 PC5/CD4 FITC/CD45RA PE, CD45 PC5/CD4 FITC/CD45RO PE | sangue con eparina | %contenuto | 5 w.d. | 1680,00 rubli. |
| Indicatori funzionali | ||||
| CD4/CD4OL | sangue con eparina | %contenuto | 5 w.d. | RUB 780,00 |
| CD4/CD28 | sangue con eparina | %contenuto | 5 w.d. | RUB 780,00 |
| CD8/CD28 | sangue con eparina | %contenuto | 5 w.d. | RUB 780,00 |
| CD8/CD57 | sangue con eparina | %contenuto | 5 w.d. | RUB 780,00 |
| cellule B1. CD5+CD19+ | sangue con eparina | %contenuto | 5 w.d. | 2840,00 rubli. |
| Immunità umorale | ||||
| Immunoglobuline A, M, G | sangue (siero) | contare | 5 w.d. | RUB 780,00 |
| Immunoglobulina E (IgE) | sangue (siero) | contare | 5 w.d. | RUB 780,00 |
| Immunoglobulina A (IgA) | sangue (siero) | contare | 5 w.d. | 290,00 rub. |
| Immunoglobulina M (IgM) | sangue (siero) | contare | 5 w.d. | 290,00 rub. |
| Immunoglobulina G (IgG) | sangue (siero) | contare | 5 w.d. | 290,00 rub. |
| Attività funzionale dei neutrofili | ||||
| Prova NST | sangue con eparina | contare | 5 w.d. | 420,00 rub. |
| Componenti del complemento | ||||
| C3 | sangue (siero) | contare | 5 w.d. | 730,00 rub. |
| C4 | sangue (siero) | contare | 5 w.d. | 730,00 rub. |
| Complessi circolanti comuni (CEC) | sangue (siero) | contare | 5 w.d. | 240,00 rub. |
| Stato dell'interferone | ||||
| Stato dell'interferone senza determinare la sensibilità al farmaco | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | RUB 2870,00 |
| Anticorpi neutralizzanti la preparazione dell'interferone | sangue (siero) | contare | 10 w.d. | 2840,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue ai farmaci interferone | ||||
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Reaferon | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Roferon | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Wellferon | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue all'introne | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue al Realdiron | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue al Genferon | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue all'Interal | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue al Gammaferon | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Betaferon | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue ai farmaci che inducono l'interferone | ||||
| Sensibilità dei leucociti del sangue ad Amiksin | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Neovir | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue al cicloferone | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Ridostin | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Kagocel | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue agli immunomodulatori dell'interferone | ||||
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Lykopid | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue all'Imunofan | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue al poliossidonio | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Imunomax | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue all'Arbidol | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Galavit | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Gepon | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue al glutoxim | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Taktivin | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Thymogen | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Immunal | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti del sangue a Imunorix | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 520,00 rubli. |
| Sensibilità dei leucociti ai farmaci approvati per l'uso nei bambini | ||||
| Sensibilità dei leucociti ad Amiksin per i bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti ad Arbidol per i bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti a Gepon per i bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti a Immunomax per bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti all'Imunofan nei bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti a Kagocel per bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti a Lykopid per i bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti al poliossidonio per i bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti a Taktivin per i bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti a Thymogen nei bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti a Cycloferon per i bambini | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti al Viferon per i bambini (supposte, unguento, gel) | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
| Sensibilità dei leucociti al Grippferon per i bambini (gocce) | sangue con eparina | contare | 10 w.d. | 470,00 rub. |
r.d.- giorno lavorativo, contare- quantitativo
- 1.Microbiologia medica. Oggetto, compiti, metodi, connessione con altre scienze. L'importanza della microbiologia medica nell'attività pratica del medico.
- 3. Microrganismi e loro posizione nel sistema del mondo vivente. Nomenclatura dei batteri. Principi di classificazione.
- 6. Crescita e riproduzione dei batteri. Fasi della riproduzione.
- 7. Nutrizione dei batteri. Tipi e meccanismi di nutrizione batterica. Autotrofi ed eterotrofi. Fattori di crescita. Prototrofi e auxotrofi.
- 8. Mezzi nutritivi. Mezzi nutritivi artificiali: diagnostica semplice, complessa, di uso generale, elettiva, differenziale.
- 9. Metodo batteriologico per studiare i microrganismi. Principi e metodi per isolare colture pure di batteri aerobici e anaerobici. La natura della crescita dei microrganismi su mezzi nutritivi liquidi e solidi.
- 13. Spirochete, loro morfologia e proprietà biologiche. Specie patogene per l'uomo.
- 14. Rickettsia, loro morfologia e proprietà biologiche. Il ruolo della rickettsia nella patologia infettiva.
- 15. Morfologia e ultrastruttura dei micoplasmi. Specie patogene per l'uomo.
- 16. Clamidia, morfologia e altre proprietà biologiche. Ruolo in patologia.
- 17. Funghi, loro morfologia e caratteristiche biologiche. Principi di tassonomia. Malattie causate da funghi nell'uomo.
- 20. Interazione del virus con la cellula. Fasi del ciclo di vita. Il concetto di persistenza di virus e infezioni persistenti.
- 21. Principi e metodi di diagnosi di laboratorio delle infezioni virali. Metodi di coltivazione del virus.
- 24. Struttura del genoma batterico. Elementi genetici mobili, loro ruolo nell'evoluzione dei batteri. Il concetto di genotipo e fenotipo. Tipi di variabilità: fenotipica e genotipica.
- 25. Plasmidi batterici, loro funzioni e proprietà. Utilizzo dei plasmidi nell'ingegneria genetica.
- 26. Ricombinazioni genetiche: trasformazione, trasduzione, coniugazione.
- 27. Ingegneria genetica. Utilizzo di metodi di ingegneria genetica per ottenere farmaci diagnostici, preventivi e terapeutici.
- 28.Distribuzione dei microbi in natura. Microflora del suolo, dell'acqua, dell'aria, metodi per studiarla. Caratteristiche dei microrganismi indicatori sanitari.
- 29. Microflora normale del corpo umano, suo ruolo nei processi fisiologici e nella patologia. Il concetto di disbatteriosi. Preparati per ripristinare la normale microflora: eubiotici (probiotici).
- 31. Forme di manifestazione dell'infezione. Persistenza di batteri e virus. Il concetto di recidiva, reinfezione, superinfezione.
- 32. Dinamica dello sviluppo del processo infettivo, i suoi periodi.
- 33. Il ruolo dei microrganismi nel processo infettivo. Patogenicità e virulenza. Unità di misura della virulenza. Il concetto di fattori di patogenicità.
- 34. Classificazione dei fattori di patogenicità secondo o.V. Bucharin. Caratteristiche dei fattori di patogenicità.
- 35. Il concetto di immunità. Tipi di immunità.
- 36. Fattori protettivi aspecifici dell'organismo contro le infezioni. Ruolo di I.I. Mechnikov nella formazione della teoria cellulare dell'immunità.
- 37. Antigeni: definizione, proprietà fondamentali. Antigeni delle cellule batteriche. Uso pratico degli antigeni batterici.
- 38. Struttura e funzioni del sistema immunitario. Cooperazione di cellule immunocompetenti. Forme di risposta immunitaria.
- 39. Immunoglobuline, loro struttura molecolare e proprietà. Classi di immunoglobuline. Risposta immunitaria primaria e secondaria. :
- 40. Classificazione dell'ipersensibilità secondo Jail e Coombs. Fasi di una reazione allergica.
- 41. Ipersensibilità immediata. Meccanismi di insorgenza, significato clinico.
- 42. Shock anafilattico e malattia da siero. Cause di insorgenza. Meccanismo. Il loro avvertimento.
- 43. Ipersensibilità ritardata. Test allergici cutanei e loro utilizzo nella diagnosi di alcune malattie infettive.
- 44. Caratteristiche dell'immunità antivirale, antifungina, antitumorale, da trapianto.
- 45. Concetto di immunologia clinica. Stato immunitario umano e fattori che lo influenzano. Valutazione dello stato immunitario: principali indicatori e metodi per la loro determinazione.
- 46. Immunodeficienze primarie e secondarie.
- 47. Interazione dell'antigene con l'anticorpo in vitro. Teoria delle strutture di rete.
- 48. Reazione di agglutinazione. Componenti, meccanismo, metodi di installazione. Applicazione.
- 49. Reazione di Coombs. Meccanismo. Componenti. Applicazione.
- 50. Reazione di emoagglutinazione passiva. Meccanismo. Componenti. Applicazione.
- 51. Reazione di inibizione dell'emoagglutinazione. Meccanismo. Componenti. Applicazione.
- 53. Reazione di fissazione del complemento. Meccanismo. Componenti. Applicazione.
- 54. La reazione di neutralizzazione di una tossina con un'antitossina, neutralizzando i virus nella coltura cellulare e nel corpo degli animali da laboratorio. Meccanismo. Componenti. Metodi di stadiazione. Applicazione.
- 55. Reazione di immunofluorescenza. Meccanismo. Componenti. Applicazione.
- 56. Test immunoenzimatico. Immunoblot. Meccanismi. Componenti. Applicazione.
- 57. Vaccini. Definizione. Classificazione moderna dei vaccini. Requisiti per i prodotti vaccinali.
- 59. Prevenzione dei vaccini. Vaccini ottenuti da batteri e virus uccisi. Principi di cottura. Esempi di vaccini uccisi. Vaccini associati. Vantaggi e svantaggi dei vaccini uccisi.
- 60. Vaccini molecolari: tossoidi. Ricevuta. Utilizzo dei tossoidi per la prevenzione delle malattie infettive. Esempi di vaccini.
- 61. Vaccini geneticamente modificati. Ricevuta. Applicazione. Vantaggi e svantaggi.
- 62. Terapia vaccinale. Il concetto di vaccini terapeutici. Ricevuta. Applicazione. Meccanismo di azione.
- 63. Preparazioni antigeniche diagnostiche: diagnosticum, allergeni, tossine. Ricevuta. Applicazione.
- 64. Sieri. Definizione. Classificazione moderna dei sieri. Requisiti per i preparati a base di siero di latte.
- 65. I preparati anticorpali sono sieri utilizzati per il trattamento e la prevenzione delle malattie infettive. Modalità di ottenimento. Complicazioni durante l'uso e loro prevenzione.
- 66. I preparati anticorpali sono sieri utilizzati per diagnosticare malattie infettive. Modalità di ottenimento. Applicazione.
- 67. Concetto di immunomodulatori. Principio operativo. Applicazione.
- 68. Interferoni. Natura, metodi di produzione. Applicazione. N. 99 Interferoni. Natura, metodi di produzione. Applicazione.
- 69. Farmaci chemioterapici. Il concetto di indice chemioterapico. I principali gruppi di farmaci chemioterapici, il meccanismo della loro azione antibatterica.
- 71. Resistenza ai farmaci dei microrganismi e meccanismo della sua insorgenza. Il concetto di ceppi ospedalieri di microrganismi. Modi per superare la resistenza ai farmaci.
- 72. Metodi per la diagnosi microbiologica delle malattie infettive.
- 73. Agenti causali della febbre tifoide e della febbre paratifoide. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 74. Agenti patogeni dell'escherichiosi. Tassonomia. Caratteristica. Il ruolo dell'Escherichia coli in condizioni normali e patologiche. Diagnosi microbiologica dell'escherichiosi.
- 75. Patogeni della shigellosi. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 76. Agenti patogeni della salmonellosi. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnosi microbiologica della salmonellosi. Trattamento.
- 77. Patogeni del colera. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 78. Stafilococchi. Tassonomia. Caratteristica. Diagnosi microbiologica delle malattie causate da stafilococchi. Prevenzione e trattamento specifici.
- 79. Streptococchi. Tassonomia. Caratteristica. Diagnosi microbiologica delle infezioni streptococciche. Trattamento.
- 80. Meningococchi. Tassonomia. Caratteristica. Diagnosi microbiologica delle infezioni streptococciche. Trattamento.
- 81. Gonococchi. Tassonomia. Caratteristica. Diagnosi microbiologica della gonorrea. Trattamento.
- 82. Agente causativo della tularemia. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 83. L'agente eziologico dell'antrace. Tassonomia e caratteristiche. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 84. Agente causativo della brucellosi. Tassonomia e caratteristiche. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 85. Agente causativo della peste. Tassonomia e caratteristiche. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 86. Patogeni dell'infezione da gas anaerobico. Tassonomia e caratteristiche. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 87. Agenti causativi del botulismo. Tassonomia e caratteristiche Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 88. L'agente eziologico del tetano. Tassonomia e caratteristiche. Diagnosi e trattamento microbiologico.
- 89. Anaerobi non sporigeni. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnosi e trattamento microbiologico.
- 90. L'agente eziologico della difterite. Tassonomia e caratteristiche. Corinebatteri condizionatamente patogeni. Diagnostica microbiologica. Rilevazione dell'immunità anossica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 91. Agenti patogeni della pertosse e della parapertosse. Tassonomia e caratteristiche. Diagnostica microbiologica. Prevenzione e trattamento specifici.
- 92. Patogeni della tubercolosi. Tassonomia e caratteristiche. Micobatteri condizionatamente patogeni. Diagnosi microbiologica della tubercolosi.
- 93. Actinomiceti. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica microbiologica. Trattamento.
- 95. L'agente eziologico della clamidia. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnostica microbiologica. Trattamento.
- 96. Agente causativo della sifilide. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica microbiologica. Trattamento.
- 97. Agente causativo della leptospirosi. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnostica microbiologica. Prevenzione specifica. Trattamento.
- 98. Agente causativo della borreliosi. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnostica microbiologica.
- 99. Microbiologia clinica, suoi compiti. Vbi, caratteristiche della causa dell'insorgenza. Il ruolo dei microrganismi condizionatamente patogeni nell'insorgenza di infezioni nosocomiali.
- 100. Classificazione dei funghi. Caratteristica. Ruolo in patologia. Diagnostica di laboratorio. Trattamento.
- 101. Classificazione delle micosi. Micosi superficiali e profonde. Funghi simili al lievito del genere Candida. Ruolo nella patologia umana.
- 102. L'agente eziologico dell'influenza. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione e trattamento specifici.
- 103. L'agente eziologico della poliomielite. Tassonomia e caratteristiche. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione specifica.
- 104. Patogeni dell'epatite a ed e. Caratteristiche. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione specifica.
- 105. Agente eziologico dell'encefalite trasmessa da zecche. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione specifica.
- 106. Agente della rabbia. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione specifica.
- 107. L'agente eziologico della rosolia. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione specifica.
- 108. Virus del morbillo. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione specifica.
- 109. Agente causativo della parotite. Tassonomia. Caratteristica. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione specifica.
- V.Clinica
- I. Epidemiologia
- 110. Infezione da herpes: tassonomia, caratteristiche dei patogeni. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione e trattamento specifici.
- 111. L'agente eziologico del vaiolo. Tassonomia. Caratteristiche. Diagnostica di laboratorio. Prevenzione specifica del vaiolo nella fase attuale
Valutazione dello stato immunitario effettuato in clinica per trapianti di organi e tessuti, malattie autoimmuni, allergie, per identificare deficit immunologici in varie malattie infettive e somatiche, per monitorare l'efficacia del trattamento di malattie associate a disturbi del sistema immunitario. A seconda delle capacità del laboratorio, la valutazione dello stato immunitario si basa molto spesso sulla determinazione di una serie dei seguenti indicatori:
1) esame clinico generale;
2) lo stato dei fattori di resistenza naturale;
3) immunità umorale;
4) immunità cellulare;
5) test aggiuntivi.
Durante un esame clinico generale prendere in considerazione i reclami del paziente, l'anamnesi, i sintomi clinici, i risultati di un esame del sangue generale (incluso il numero assoluto di linfociti), i dati di uno studio biochimico.
Immunità umorale determinato dal livello di immunoglobuline delle classi G, M, A, D, E nel siero del sangue, dalla quantità di anticorpi specifici, dal catabolismo delle immunoglobuline, dall'ipersensibilità immediata, dall'indicatore dei linfociti B nel sangue periferico, dalla trasformazione blastica di B- linfociti sotto l'influenza dei mitogeni delle cellule B e altri test.
Stato dell'immunità cellulare valutato in base al numero di linfociti T, nonché sottopopolazioni di linfociti T nel sangue periferico, trasformazione blastica dei linfociti T sotto l'influenza dei mitogeni delle cellule T, determinazione degli ormoni timici, livello delle citochine secrete, nonché come test cutanei con allergeni, sensibilizzazione da contatto con dinitroclorobenzene. Per eseguire i test di allergia cutanea si utilizzano antigeni ai quali normalmente dovrebbe esserci sensibilizzazione, ad esempio il test di Mantoux con tubercolina. La capacità del corpo di indurre una risposta immunitaria primaria può essere fornita dalla sensibilizzazione da contatto con dinitroclorobenzene.
COMEtest aggiuntivi Per valutare lo stato immunitario, è possibile utilizzare test come la determinazione del battericida™ nel siero del sangue, la titolazione dei componenti C3 e C4 del complemento, la determinazione della proteina C-reattiva nel siero del sangue, la determinazione dei fattori reumatoidi e altri autoanticorpi.
Così, la valutazione dello stato immunitario viene effettuata sulla base di un gran numero di test di laboratorio che consentono di valutare lo stato sia delle componenti umorali e cellulari del sistema immunitario, sia dei fattori di resistenza aspecifica. Tutte le prove sono divise in due gruppi: prove di 1° e 2° livello. I test di livello 1 possono essere eseguiti in qualsiasi laboratorio di immunologia clinica di assistenza primaria e vengono utilizzati per l'identificazione iniziale di soggetti con evidente immunopatologia. Per una diagnosi più accurata, vengono utilizzati test di livello 2.
Concetto di immunologia clinica. Stato immunitario umano e i fattori che lo influenzano .
Immunologia clinicaè una disciplina clinica e di laboratorio che studia i problemi della diagnosi e del trattamento dei pazienti affetti da varie malattie e condizioni patologiche basate su meccanismi immunologici, nonché condizioni nel trattamento e nella prevenzione delle quali i farmaci immunoterapici svolgono un ruolo di primo piano.
Stato immunitarioè lo stato strutturale e funzionale del sistema immunitario dell’individuo, determinato da una serie di indicatori immunologici clinici e di laboratorio.
Pertanto, lo stato immunitario caratterizza lo stato anatomico e funzionale del sistema immunitario, cioè la sua capacità di innescare una risposta immunitaria a un antigene specifico in un dato momento.
Per lo stato immunitario influiscono i seguenti fattori:
Climatico-geografico; sociale; ambientale (fisico, chimico e biologico); “medico” (effetto di farmaci, interventi chirurgici, stress, ecc.).
Tra i fattori climatici e geografici Lo stato immunitario è influenzato dalla temperatura, dall'umidità, dalla radiazione solare, dalla durata del giorno, ecc. Ad esempio, la reazione fagocitaria e i test cutanei allergici sono meno pronunciati negli abitanti delle regioni settentrionali che in quelli meridionali. Il virus Epstein-Barr provoca una malattia infettiva nelle persone di razza bianca - mononucleosi, nelle persone di razza negroide - oncopatologia (linfoma di Burkitt) e nelle persone di razza gialla - un'oncopatologia completamente diversa (carcinoma nasofaringeo), e solo negli uomini. Gli africani sono meno suscettibili alla difterite rispetto agli europei.
Ai fattori sociali che influenzano lo stato immunitario includono alimentazione, condizioni di vita, rischi professionali, ecc. Una dieta equilibrata e razionale è importante, poiché il cibo fornisce all'organismo le sostanze necessarie per la sintesi delle immunoglobuline, per la costruzione di cellule immunocompetenti e il loro funzionamento . È particolarmente importante che la dieta contenga aminoacidi e vitamine essenziali, in particolare A e C.
Le condizioni di vita hanno un impatto significativo sullo stato immunitario del corpo. Vivere in condizioni abitative inadeguate porta ad una diminuzione della reattività fisiologica generale, rispettivamente dell'immunoreattività, che è spesso accompagnata da un aumento del livello di morbilità infettiva.
I rischi professionali hanno una grande influenza sullo stato immunitario, poiché una persona trascorre gran parte della sua vita al lavoro. I fattori industriali che possono avere un effetto negativo sul corpo e ridurre l'immunoreattività includono radiazioni ionizzanti, sostanze chimiche, microbi e i loro prodotti metabolici, temperatura, rumore, vibrazioni, ecc. Le fonti di radiazioni sono oggi molto diffuse in vari settori industriali (energia, estrazione mineraria, chimica , aerospaziale, ecc.).
Sali di metalli pesanti, composti aromatici, alchilanti e altri prodotti chimici, inclusi detergenti, disinfettanti, pesticidi e pesticidi, ampiamente utilizzati nella pratica, hanno un effetto negativo sullo stato immunitario. I lavoratori delle industrie chimiche, petrolchimiche, metallurgiche, ecc. sono esposti a tali rischi professionali.
I microbi e i loro prodotti metabolici (molto spesso proteine e loro complessi) hanno un effetto negativo sullo stato immunitario del corpo tra i lavoratori delle industrie biotecnologiche associate alla produzione di antibiotici, vaccini, enzimi, ormoni, proteine del mangime, ecc.
Fattori come la temperatura bassa o alta, il rumore, le vibrazioni e l'illuminazione insufficiente possono ridurre l'immunoreattività avendo un effetto indiretto sul sistema immunitario attraverso il sistema nervoso ed endocrino, che sono in stretta relazione con il sistema immunitario.
I fattori ambientali hanno un effetto globale sullo stato immunitario umano, prima di tutto, l'inquinamento ambientale dovuto a sostanze radioattive (combustibile esaurito dai reattori nucleari, fuoriuscita di radionuclidi dai reattori durante incidenti), uso diffuso di pesticidi in agricoltura, emissioni di imprese e veicoli chimici, industrie biotecnologiche.
Lo stato immunitario è influenzato da varie procedure mediche diagnostiche e terapeutiche., terapia farmacologica, stress. L’uso irragionevole e frequente della radiografia e della scansione dei radioisotopi può influenzare il sistema immunitario. L'immunoreattività cambia dopo un trauma e un intervento chirurgico. Molti farmaci, compresi gli antibiotici, possono avere effetti collaterali immunosoppressivi, soprattutto con l’uso a lungo termine. Lo stress porta a interruzioni nel funzionamento del sistema immunitario T, che agisce principalmente attraverso il sistema nervoso centrale.
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Indicatori aspecifici dello stato immunitario
Immunodiagnostica – questo è l'uso di reazioni e metodi immunologici allo scopo di valutare lo stato immunitario, la diagnosi di laboratorio delle malattie, nonché per identificare gli antigeni.
Tutti i metodi immunodiagnostici sono divisi in 2 gruppi:
Metodi generali non specifici , che caratterizza lo stato di varie parti del sistema immunitario: linfociti, granulociti, macrofagi, complemento. Di solito vengono utilizzati per identificare un difetto nel SI, ad es. per le immunodeficienze.
Metodi specifici , consentendo l'identificazione di anticorpi, linfociti T immunitari, antigeni nel corpo umano o antigeni patogeni nell'ambiente esterno. Questi metodi vengono utilizzati per diagnosticare infezioni, allergie e malattie autoimmuni.
Stato immunitario – questo è lo stato di SI di una persona sana o malata in un certo momento dell'ontogenesi in specifiche condizioni ambientali.
In particolare, lo stato immunitario di un bambino differisce da quello di un adulto. Cambia anche sotto l'influenza di influenze avverse.
Per valutare lo stato immunitario, viene utilizzata la determinazione di indicatori non specifici e specifici. Valutazione dello stato immunitarioè il processo per ottenere una serie di indicatori quantitativi e funzionali che riflettono lo stato dell'IS. Viene effettuato per identificare la natura dell'immunopatologia: immunodeficienza e malattie allergiche.
Per fare ciò, viene innanzitutto raccolta l'anamnesi del paziente e viene eseguito un esame clinico generale. Ciò che è importante è la formula del sangue: il numero di leucociti di diversi tipi: neutrofili, eosinofili, basofili, monociti, linfociti. Leucocitosi: durante le infezioni si osserva spesso un aumento del numero totale di leucociti (più di 9x10 9 / l); leucopenia - diminuzione del loro numero (meno di 4 x10 9 / l) - con autoallergia; eosinofilia: un aumento del numero (oltre il 3%) di eosinofili con allergie esogene, ecc. Tuttavia, questi dati sono generalmente insufficienti ed è necessaria una definizione più dettagliata delle popolazioni, delle sottopopolazioni di leucociti e dei fattori immunitari umorali.
Caratteristiche dei linfociti T
1. Determinare il numero totale di leucociti, emocromo e conta linfocitaria. Normalmente, i linfociti rappresentano il 20-36% tra gli altri leucociti (circa 2000 cellule in 1 mm 3 di sangue).
2. Conteggio percentuale e numero di linfociti T. Normalmente, tra i linfociti del sangue ce ne sono il 50-70% (1000-1400 cellule in 1 mm 3 di sangue).
Un metodo semplice per determinare le cellule T: contare il numero (percentuale) di linfociti che formano rosette con eritrociti di pecora utilizzando CD2-AG:
un uguale volume di sospensione all'1% di eritrociti di pecora lavati viene aggiunto alla sospensione di leucociti e incubato a 37°C per 15 minuti e per tutta la notte a 4°C;
si risospende il sedimento, si aggiunge una soluzione di glutaraldeide alla concentrazione finale dello 0,06% per fissare le rosette e si effettuano immediatamente gli strisci;
gli strisci vengono asciugati, fissati con alcool e colorati secondo Romanovsky-Giemsa;
contare la percentuale di linfociti T che hanno legato tre o più globuli rossi;
Attualmente, la popolazione generale di linfociti T viene rilevata utilizzando anticorpi monoclonali marcati contro gli antigeni CD (CD2, CD3) in una reazione di immunofluorescenza (tenendo conto dei risultati su un microscopio a fluorescenza, su un citometro a flusso) o in una reazione con particelle rivestite con tali anticorpi. Normalmente, nel sangue di una persona, tra tutti i linfociti, il 55-80% sono cellule T.
3. Determinare il contenuto di T-helper e T-suppressori utilizzando anticorpi monoclonali contro gli antigeni CD4 (Tx) e CD8 (Tc).
Negli esseri umani, nel sangue si trovano normalmente il 33-46% di Tx e il 17-25% di Tc, il rapporto Tx/Tc = 1,4-2,0 - l'indice immunoregolatorio. In caso di malattia, questo indice cambia. Ad esempio, con l'AIDS diminuisce (0,04), perché sono inibiti da Tx (il recettore del virus dell'AIDS è l'antigene Tx CD4). Per le malattie autoimmuni e allergiche l’indice è maggiore di 2,0.
4. Per identificare le cellule T attivate, vengono determinati i recettori IL-2 (CD25), gli antigeni HLA-DR e il CD71 (recettore della transferrina).
5. Determinare il livello di varie citochine nel sangue (di solito utilizzando un test immunoenzimatico).
Vengono inoltre studiati gli indicatori funzionali dei linfociti T: attività proliferativa (vedi RBTL, RPML), attività citotossica e citochinica. La conta dei linfociti T diminuisce nelle immunodeficienze delle cellule T.
Caratteristiche dei linfociti B
1. Il numero totale di linfociti B può essere determinato utilizzando anticorpi monoclonali contro gli antigeni CD19-CD22, CD72. Vengono utilizzati anche anticorpi contro le immunoglobuline, che si trovano sulla superficie dei linfociti B. I linfociti B costituiscono il 17-25% di tutti i linfociti (600-800 cellule in 1 mm 3 di sangue). A volte vengono identificati linfociti B che hanno recettori per gli eritrociti di topo (10-15%), che costituiscono solo una parte della sottopopolazione B.
2. I prodotti dei linfociti B - le immunoglobuline delle classi G, M, A nel siero del sangue e in vari fluidi biologici vengono determinati utilizzando immunodiffusione radiale in agar – Reazioni di precipitazione di Mancini.
Per fare questo, versare il 2% di agar mescolato con anticorpi anti-IgG su una lastra di vetro (o una capsula di Petri); sulla seconda piastra - con anticorpi contro IgM, sulla 3a - contro IgA. Dopo la solidificazione, nell'agar vengono realizzati dei pozzetti del diametro di 2 mm. Siero standard con una concentrazione nota di IgG, IgM, IgA viene aggiunto a una fila di pozzetti su ciascuna piastra. Il siero sanguigno del paziente da testare viene aggiunto ad altri pozzetti.
Riso. 5.1. Immunodiffusione radiale semplice in agar per la determinazione degli antigeni (immunoglobuline)
Le immunoglobuline si diffondono nell'agar e nel punto di incontro con gli anticorpi presenti nell'agar si forma una zona ad anello di precipitazione. Il diametro di questo anello dipende dalla concentrazione di Ig (più Ig, maggiore è il diametro). Il diametro della zona di precipitazione viene misurato per tre diluizioni di siero standard e su carta semilogaritmica viene tracciato un grafico della dipendenza del quadrato del diametro dell'anello di precipitazione (D) dalla quantità di Ig nel siero del sangue ( Figura 5.1). Quindi viene misurato il diametro dell'anello di precipitazione del siero in esame, riportato sul grafico e viene determinata la concentrazione di immunoglobulina. Per determinare le IgA secretorie (nella saliva, ecc.), viene utilizzato un metodo simile in due versioni: l'IgA (catena a) e la sua componente secretiva vengono determinate utilizzando anticorpi appropriati.
Standard per adulti: 0,8-2 g/l IgM; 8,0-13,0 g/l IgG; 1,4-3,0 g/l IgA. Nei neonati, il livello di IgG è vicino al livello materno, IgM e IgA sono presenti in tracce; entro 4-6 mesi. il livello di IgG scende a 5-6 g/l per poi aumentare. Con lo sviluppo normale dei bambini, il livello delle immunoglobuline all'età di 2 anni è vicino ai loro valori negli adulti.
Il livello di IgA secretorie nella saliva è 0,03-0,4 g/l.
Con l'immunodeficienza, il livello delle immunoglobuline diminuisce (ipogammaglobulinemia) e con la stimolazione dell'SI e dell'infiammazione aumenta (ipergammaglobulinemia).
Viene determinato il livello di anticorpi naturali (contro antigeni del gruppo sanguigno, globuli rossi animali, ecc.) e immunitari (contro antigeni batterici e virali comuni, vaccini). È ridotto (o gli anticorpi sono assenti) nelle immunodeficienze
Caratteristiche del sistema granulocitario e monocitario
1. Determinare il numero di leucociti nel sangue e il rapporto tra i loro tipi (neutrofili, basofili, eosinofili, monociti).
2. Valutare assorbimento e attività digestiva dei fagociti: Una sospensione di una coltura giornaliera lavata di stafilococchi viene aggiunta ad una sospensione di leucociti o ad una goccia di sangue. Preparare 3 campioni, incubare a 37 0 C, il 1° campione per 45 minuti, il 2° - 60 minuti, il 3° - 90 minuti. Gli strisci vengono preparati, asciugati, fissati con etanolo e colorati secondo Romanovsky.
Vengono determinati l'indice fagocitico e il numero fagocitico.
Numero fagocitico – questo è il numero medio di particelle o microrganismi in un fagocita (la norma per gli stafilococchi è 6-12, la candida è 2-4).
Indice fagocitico– questo è il numero di fagociti che partecipano alla fagocitosi, avendo assorbito particelle (normale – 60-80%).
La valutazione degli indicatori a diversi intervalli di tempo ci consente di valutare la dinamica della fagocitosi. Normalmente, dopo 90 minuti, l'indice fagocitico dovrebbe essere inferiore rispetto a dopo 45 e 60 minuti, a causa della digestione dei microbi. Se la digestione viene interrotta, non cambia.
Digestione i microbi possono essere valutati seminando i lisati leucocitari (dopo incubazione con i microbi) su terreni nutritivi e contando le colonie coltivate. Il metodo prevede l'uso di microrganismi viventi come oggetto di fagocitosi. Dopo l'incubazione con i microbi (vedi sopra), i fagociti vengono pellettizzati mediante centrifugazione, lavati e lisati. I loro lisati sono placcati su un mezzo nutritivo solido. L'attività digestiva dei fagociti è valutata dal numero di colonie cresciute.
Attività metabolica vengono determinati i fagociti Test di riduzione del blu nitro-tetrazolio (Prova NST) dopo averli verniciati con una soluzione allo 0,25% di questo colorante. Normalmente, il nitroblu tetrazolio colora (diffusamente e sotto forma di grumi blu) il 15-18% dei neutrofili durante le infezioni, il loro numero aumenta fino al 40% o più;
Gli indicatori dei fagociti diminuiscono con le corrispondenti immunodeficienze e aumentano con un decorso favorevole dell'infezione.
3. Gli antigeni di differenziazione, attivazione e adesione (CD14, CD11, CD18, HLA-DR, ecc.) vengono determinati sui fagociti utilizzando anticorpi monoclonali.
4. Vengono identificati i recettori per la componente C3 del complemento, le immunoglobuline, ecc.
5. Viene valutata la migrazione spontanea e diretta (chemiotassi).
6. Determinare la capacità di secernere citochine (IL-1, TNF, ecc.) e il loro livello nel sangue.
Caratteristiche del sistema del complemento
1. Determinare l'attività emolitica del complemento nella reazione di emolisi utilizzando il sistema emolitico. Questo sistema è costituito da globuli rossi di pecora trattati con siero emolitico.
La determinazione del complemento si basa sulla capacità dei suoi prodotti di attivazione di provocare la lisi dei globuli rossi rivestiti di anticorpi. Il grado di emolisi viene utilizzato per giudicare l'attività emolitica del complemento.
L'unità emolitica (CH50) viene utilizzata come unità di misura del complemento, la quantità di complemento che provoca la lisi al 50% di una sospensione al 3% di eritrociti sensibilizzati dagli anticorpi ad una temperatura di 37°C per 45 minuti. La titolazione del complemento si riduce alla determinazione del numero di unità emolitiche CH50 in un volume specifico di siero. Per fare ciò, una quantità standard di eritrociti sensibilizzati viene aggiunta a varie dosi di siero. Quindi, utilizzando la scala di lisi dei globuli rossi con acqua distillata, si trova il numero di unità CH50.
Il grado di emolisi durante la titolazione del complemento può essere determinato mediante metodi fotometrici (utilizzando uno spettrofotometro, fotocolorimetro, nefelometro) o visivamente confrontando l'intensità dell'emolisi nelle provette con una scala standard di eritrociti lisati.
2. Vengono identificati i prodotti di attivazione C4a, C3a, C5a, ecc.